MEM培養(yǎng)基是一種基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基，是動物細(xì)胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基之一。MEM培養(yǎng)基僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素，成分簡單，主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，配方修改后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)。MEM含NEAA(非必須氨基酸)的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。 MEM培養(yǎng)基操作步驟：
1.配置前準(zhǔn)備：配置培養(yǎng)基新制備的milli water。調(diào)節(jié)pH值的酸堿溶液也應(yīng)該使用這種水配置。制備培養(yǎng)基的器皿清洗干凈，并用milli water潤洗兩次。
2.溶解培養(yǎng)基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將干粉培養(yǎng)基倒入燒杯，水洗包裝袋內(nèi)面兩次，倒入培養(yǎng)液中。磁力攪拌助溶。
3.補(bǔ)加試劑：根據(jù)包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。
4.加抗生素：一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml，鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。
5.調(diào)pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH調(diào)節(jié)pH到7.2。
6.過濾除菌：采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3。
7.加小牛血清：根據(jù)培養(yǎng)基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。
MEM培養(yǎng)基的一些基本知識點(diǎn)先介紹到這里了，如果您還想要了解更多內(nèi)容，歡迎來咨詢我們。
